577124-U/SIGMA液相色譜柱具有分離效能高、分析速度快、檢測(cè)靈敏度好、能分析高沸點(diǎn)但不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床分析。
液相色譜柱是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑,緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,經(jīng)進(jìn)樣閥注入待測(cè)樣品,由流動(dòng)相帶入柱內(nèi),在柱內(nèi)各成分被分離后依次進(jìn)入檢測(cè)器,色譜信號(hào)由記錄儀、積分儀或色譜工作站記錄。
液相色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。因此對(duì)液相色譜柱的維護(hù)是關(guān)鍵。
577124-U/SIGMA液相色譜柱的保護(hù)
1、用預(yù)柱。(但要注意,若有時(shí)出峰異常,要先看看是不是它有問(wèn)題了)
2、每次做完分析,都要進(jìn)行沖洗,
分析用流動(dòng)相中若無(wú)酸、堿、鹽類物質(zhì),建議用90%甲醇沖洗30~60min;
若分析用流動(dòng)相中含以上物質(zhì),要先用10%甲醇(或用與分析用流動(dòng)相同比例,把含酸、堿、鹽溶液換成水)沖洗1小時(shí)左右,再梯度走到90%甲醇沖洗30~60min(若用多元泵)。有必要時(shí)再循環(huán)幾次,可以適當(dāng)縮短時(shí)間。
若長(zhǎng)時(shí)間不用該色譜柱,要沖洗好后,用純甲醇或乙腈封存。
3、若流動(dòng)相中用到離子對(duì)試劑,更應(yīng)該好好沖洗,且該色譜柱作為,不能再做其它物質(zhì)分析用。因色譜柱填料性質(zhì)已與原來(lái)所不同,在該柱上所摸索的色譜條件,可能在其它同類柱子上得不到重現(xiàn)。
4、盡量避免反沖,除非該色譜柱廠家明確說(shuō)明允許。
5、普通C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析。
6、定期測(cè)柱效,有下降,可以用10%異丙醇甲醇沖洗色譜柱。若柱效還沒(méi)有改善,可以再生,甲醇-二氯甲烷-甲醇。